sgRNA合成
S. pyogenes に由来するCas9(SpCas9)用に最適されたCRISPRevolution(sgRNA合成)ですべての細胞で最良のCRISPR編集結果が得られます。
標的配列(17〜23 nt)をご指定いただくだけで,最大90%の高いゲノム編集効率を持つsgRNAを合成し, 1.5nmolから500+nmolのスケールでsgRNA合成キットとしてお届けいたします。
*本製品は研究用です。人又は動物の治療又は診断用に使用しないでください。
特徴
sgRNA | sgRNAで最高のインデル頻度をもたらし、すべての細胞で最高のCRISPR編集可能です。 | |
高純度 | 非常に純粋な合成gRNAは、比類のない編集の一貫性をもたらします。 | |
化学修飾 | 細胞の自然免疫応答の安定性が向上し、活性化が減少します。 *先頭3箇所の5’と3’末端RNA残基に2’-O-methyl analogsと3’phosphorothioate internucleotideを結合した化学修飾sgRNA |
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強力なデザインツール | CRISPR Knockout Guide Designerより,100,000種以上のゲノムと9,000の生物種から選択することで,遺伝子ノックアウト用CRISPR guideRNAを簡単にデザインできます。 | |
早くて簡単 | 従来のPlasmidやIVT、gRNAのアニーリングや精製のステップは必要ありません。また、製品はすぐにトランスフェクション可能です。 | |
少量から大量まで対応 | 少量(1.5nmol)から大量(100mol)まで |
<ユーザーVoice>
Synthego’s chemically modified sgRNA provides a critical tool for our CRISPR research when it comes to difficult stem cell gene targets. Our research into stem cell-based human therapeutics presents editing challenges that require the highest efficiency guides.
Andy Scharenberg, MD
Principal Investigator, Seattle Children’s Hospital
Synthegoの合成sgRNAは堅牢で信頼性の高いCRISPR編集を実現
Synthegoの化学修飾合成sgRNAは、最高のインデル頻度と最も再現性の高いCRISPR編集結果をもたらします。 IVTによるガイドを使用している場合、合成RNAのような結果は得られません。
同じsgRNA配列は、in vitro転写(IVT)によって生成されるか、Synthegoによって化学修飾sgRNAとして合成されました。 Synthego sgRNAを使用した実験のインデル頻度は常に90%を超えていましたが、IVTガイドによる編集は常に10%未満であり、時には検出できませんでした。 データはSt. Jude Children’s Research HospitalのShondra Pruett-Miller, PhD.のご厚意によるものです。
Synthego sgRNAは高いインデル頻度をもたらし、crRNAよりも95%以上優れています
Synthegoの化学修飾合成sgRNAは、ほぼすべての場合に2パートのcrRNAガイドよりも高いインデル頻度を生成します。
Synthego修飾sgRNAによって生成されたインデル頻度は、ヒトゲノム全体でランダムに選択された39遺伝子を超えるD社およびI社からの修飾crRNAと比較されました。 Synthego sgRNAsは、ほぼすべての比較においてcrRNAs(赤い点線より上の点)よりも優れていました。
CRISPRevolution合成RNA(sgRNA)とPlasmid、IVTの比較
Synthego(sgRNA) | Plasmid | in vitro Transcription (IVT) | |
ガイドの作製工程 | 1. 標的シークエンスを選択 2. 合成RNAを注文 |
1. 標的シークエンスを選択 2. DNAプライマーをデザイン/注文 3. guideRNAをPlasmidにPCR 4. 細胞内へトランスフェクション 5. 細胞をスクリーニング 6. シークエンスを検証 7. プラスミドDNAを精製 |
1. 標的シークエンスを選択 2. DNAプライマーをデザイン/注文 3. PCRでguideRNAを作製 4. IVT 5. guideRNAを精製 |
トランスフェクション までかかる時間 |
納品後すぐ | 1〜2週間 | 1〜3日 |
作業時間 | 数分 | 数日 | 1日 |
編集効率 | 最大90% | 中〜高 | 様々 |
ガイドの品質 | 非常に高い | 様々 | 低い(不純物があり,不一致もみられる) |
プライマリー細胞 および幹細胞 |
非常に良い | 悪い | 悪い |
オフターゲット効果 | 非常に低い | 様々(宿主ゲノム内へのDNA混入の可能性あり) | 様々(IVT用酵素がエラーを引き起こす可能性あり) |
キット内容
CRISPRevolution synthetic guide RNA 3 nmol
TE buffer 1.5 ml
Nuclease-free water 1.5 ml
価格・ご注文方法
標的配列(17〜23 mer)をご指定いただき、専用注文書を電子メール添付にて
E-mail(synthego_crispr@arbrown.com)で弊社へお送りください。
<標的配列>
5′-AUCGUUGCUGCACUUAA+Synthego Scaffold-3′