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Klenow DNAポリメラーゼ（DNA polymerase I large fragment）
Klenow DNAポリメラーゼは、5’→3'エキソヌクレアーゼ活性を欠く大腸菌DNAポリメラーゼIの欠如型です。 5’→3'ポリメラーゼ活性に加えて、インタクトな3’→5'エキソヌクレアーゼ活性が含まれているため、DNA合成のフィデリティ―は完全長のE. coli DNAポリメラーゼIと同等です。ニックトランスレーションのための鎖置換活性も含まれています。
活性
- 5'→3'エキソヌクレアーゼ活性：無
- 3‘→5'エキソヌクレアーゼ活性：有
- 鎖置換活性：有
アプリケーション
- 3 '凹末端二本鎖DNAの放射性同位元素標識
- 5’突出を埋めて、平滑二本鎖末端の精製
- 3’突出を除去して、平滑二本鎖末端の生成
- 逆転写酵素によって得られたcDNAの第2鎖合成
- ランダムプライマーによるDNAの放射性同位元素標識
- ユニットの定義
- 1ユニットは、37℃で30分間に70 mg / mlの変性ニシン精子DNAをテンプレートとして酸不溶性物質に10nmolのdNTPを組み込むのに必要な酵素の量として定義されます。
- 至適温度/温度不活性
- 至適温度：25℃
- 温度不活性：75℃、20分間
- 品質管理
- 純度：>99%（SDS-PAGE）
- エンドヌクレアーゼフリー
- エキソヌクレアーゼフリー
- RNaseフリー
- 保存温度
- -20℃