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Exonuclease VII
アプリケーション
- PCR後の一本鎖オリゴヌクレオチドプライマーの除去
- 直前のPCR増幅から残存するプライマーの影響を最小化
Exonuclease VIIはssDNAに対する特異性が高く、5’→3’エキソヌクレアーゼ活性と3’→5’エキソヌクレアーゼ活性の両方を示します。後続のPCR増幅で異なるプライマーを用いるため、PCR完了後の一本鎖オリゴヌクレオチドプライマーを迅速に除去する必要がある場合にExonuclease VIIが役立ちます。Exonuclease VIIはマグネシウム非存在下でssDNAを分解します。Exonuclease VIIは95℃、10分間の加熱によって不活性化されます。
- ユニットの定義
- 標準的な条件下、37℃で30分間に活性化された熱変性仔ウシ胸腺DNAから1 nmolの酸可溶性ヌクレオチドを放出するExonuclease VII活性を1単位とする。
- 保存バッファー
- 50 mM Tris-HCl (pH7.5)、0.1 M NaCl、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton® X-100を含む50%グリセロール溶液
- 品質管理
- Exonuclease VIIは、ssDNAの分解活性が試験されており、RNase活性、エンドヌクレアーゼ活性および二本鎖エキソヌクレアーゼ活性がないことを確認しています。
- 至適温度/温度不活性
- 至適温度：37℃
温度不活性：not determined
参考文献
Li, H. et al. (1991) Nucleic Acide Res. 19, 3139