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Exonuclease I, E. coli

アプリケーション

  • 反応混合溶液から残存するssDNA(オリゴヌクレオチドを含む)の除去
  • 核酸混合溶液からssDNAの除去

Exonuclease IはssDNAを3’→5’方向に分解1~3しますが、dsDNAは分解しません。この酵素が活性を示すためにはマグネシウムと遊離3’ヒドロキシル末端が存在する必要がありますが、幅広いバッファー条件下で活性を示し、ほとんどの反応混合液中に直接添加できます。Exonuclease Iは80℃、15分間のインキュベーションにより加熱不活性化できます。

ユニットの定義
標準的な条件下、37℃で30分間に熱変性した仔ウシ胸腺DNAから10 nmolの酸可溶性ヌクレオチドを放出するExonuclease I活性を1単位とする。
保存バッファー
50 mM Tris-HCl (pH7.5)、0.1 M NaCl、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton® X-100を含む50%グリセロール溶液
反応バッファー
500 mM Tris-HCl(pH8.0)、50 mM MgCl2
品質管理
Exonuclease Iは、ssDNAを分解することが試験されており、RNase活性、エンドヌクレアーゼ活性および二本鎖エキソヌクレアーゼ活性がないことを確認しています。
至適温度/温度不活性
至適温度:37℃
温度不活性:80℃、15分

参考文献

  1. Lehman, I.R. and Nussbaum, A.L. (1964) J. Biol. Chem. 239, 2628.
  2. Kushner, S.R. et al. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 68, 824.
  3. Kushner, S.R. et al. (1972) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69, 1366.
製品名 Cat.No. 濃度 容量
Exonuclease, E.coli X40520K 20 U/μl 20,000U

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