アプリケーションノート

QuickExtract DNA Extraction Solution

PCR用のDNA抽出が簡単に、短時間で行うことができます。

DNA抽出が、なんと８分で完了。

動物組織、毛包組織、マウス尻尾、培養細胞、口腔細胞、etc.から DNA抽出が迅速に行えます。

たったこれだけの作業！！

DNA抽出が非常に短時間で簡単にできます。

その後、PCRによるジェノタイピングが可能です。

DNAの抽出量を上げるためには、下記図のClassic Protocolで

• 65℃　30分
• マイクロアレイ
• 98℃　16分

処理することでDNAの回収量を増やすことができます。

Rapid Protocolよりも早い条件、

• 65℃　1分
• 98℃　2分

合計　3分でもDNA抽出が可能です。

しかしながら組織によっては抽出が完了しない場合もあります。 （今回マウス肝臓を用いた場合、この条件下ではほとんど回収できませんでした）

QuickExtract Solutionで回収したものは−２０℃で保存可能です（長期保存には−70℃）。

さらに、DNAの安定性も優れています。 安定性を証明するために、マウス肝臓からDNAを抽出し、37℃で4週間保存しました。 その後に、Epicentre社のPCR酵素（FailSafe）によりDNAサンプルを増幅したところ以下の結果が得られました。

• Lane 1 ： 100bpマーカー
• Lane 2 ： Classic Protcol
• Lane 3 ： Rapid Protcol
• Lane 4 ： テンプレートなし

IRF-1遺伝子の発現を確認しました。

Foward primer 5'-GCC CGG ACA CTT TCT CTG ATG-3'
Reverse primer 5'-AGA CTG CTG CTG ACG ACA CAC G

• 95℃　2分
  （※30サイクル）
• 95℃　30秒
• 55℃　30秒
• 74℃　30秒

マウス肝臓や尻尾であれば、DNAは長期間安定しています。 しかしながら抽出量を増やすためにはClassic Protcolを推奨します。

以下の実験は、
0.5mlのQuickExtract Solutionにサンプルを加え、

• 65℃　30分
• 98℃　15分

で、行ったものです。

サンプル

• 口腔細胞（Catch-All Sample Collection Swabにより5回、回転した場合）
• HeLa細胞1×10₄
• 毛髪（毛包付） 0.5-1cm
• マウス尻尾 0.5-1cm
• E.coli（コロニーピックアップ）
• 羽毛　0.5-1.0cm

増幅

• FailSafeの系に、5μlかそれ以下を 使用して増幅した。

結果

• DNAがそれぞれの組織や細胞から抽出できていること示しています。

QuickExtractの手法は、遠心なしで、スピンカラムや有毒な物質は使用しません。