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TransforMax™ EPI300™ Electrocompetent E. coli and
TransforMax™ EPI300™ Chemically Competent E. coli

TransforMax™ EPI300™ E. coli はCopyControl™ Cloning System専用に作られたコンピテント細胞です。

コンピテント細胞には、CopyControl™ pCC1™ ベクターやEZ-Tn5™<oriV/KAN-2> Insertion KitによってCopyControlの能力を組み込まれたベクター内に存在するoriVの複製開始点を開始させるために必要な変異trfA遺伝子を含んでいます。

trfA遺伝子は誘導プロモーター (inducible promoter) によってコントロールされています。また、phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E. coliはファージT1およびT5に耐性のtonAをもっています。

LB-クロラムフェニコールプレートまたはクロラムフェニコールを含んだLB、SOCメディアでCopyControlクローンはTransforMax EPI300-T1R E. coliによってシングルコピーで安定して保持されます。これは trfA遺伝子によってコピー数を抑制させているためです。さらにCopyControl™ Induction SolutionはtrfA遺伝子の発現を誘導しoriVを活性化させます。結果DNAを高収率で得ることができます。

Benefits

  • CopyControlクローンおよび EZ-Tn5 <oriV/KAN-2> Transposonによって改変されたクローンはtrfA 遺伝子によってコピー数誘導プロモーターを厳しくコントロールされます
  • あらゆるサイズのクローンに対して高い形質転換効率が認められます
  • 組換え体のblue/whiteスクリーニングにはlacZΔM15 を使用しています
  • ゲノムライブラリー用に大きなサイズのインサーションDNAも受け入れます
  • 制限マイナス (mcrA, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)) がメチル化DNAのクローニングも可能にします
  • エンドヌクレア-ゼ マイナス (endA1) がDNAを効率よく産出します
  • 組換えマイナス (recA1) が大きなクローンインサートを安定化して保持します

Figure 1. CopyControl™ BACクローンはTransforMax™ EPI300™ Electrocompetent E. coli.によってコピー数を10〜20倍誘導することができます

Figure 1.

CopyControl™ BAC クローン サイズ110 kb - 145 kb のBAC DNAの収率は>14倍に増加しました。TransforMax™ EC300™ cellを使用し、CopyControl™ Induction Solutionを加えることにより、CopyControl BAC クローンは高コピー数に変わります。「I」はCopyControl™ Induction Solutionを加え「誘導」したcell。「U」は非誘導コントロールcell。

Geneotype

F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG trfA

TransforMax™ EPI300™ Electrocompetent E. coli

  • 形質転換効率 >1 × 1010 cfu/μg / pUC19

TransforMax™ EPI300™ Chemically Competent E. coli

  • 形質転換効率 >1 × 10<sup>7</sup> cfu/μg / pUC19
  • 使いきり1回量50μl で供給されます
商品名 Cat.No. 梱包量
TransforMax™ EPI300™ Electrocompetent E. coli EC300110 10 × 100 μl
EC300150 50 × 100 μl

pUC19 control DNAが含まれます

商品名 Cat.No. 梱包量
TransforMax™ EPI300™ Chemically Competent E. coli C300C105 10 × 50μl

pUC19 control DNAが含まれます

商品名 Cat.No. 梱包量
CopyControl™ Induction Solution CCIS125 25 ml

1000X濃度溶液、フィルター滅菌済み

関連製品

  • CopyControl™ BAC Cloning Kits (BamH I, Hind III, and EcoR I)
  • CopyControl™ PCR Cloning Kits
  • Phage T1-resistant TransforMax™ EPI300™-T1R E. coli

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