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MasterPure™ Yeast DNA Purification Kit
アプリケーション
酵母からDNAを精製して、PCR増幅、制限酵素処理、サザンブロッティング、ゲノムライブラリー調整などの様々な分子生物学的アプリケーションに
真菌の同定およびタイピングに
MasterPure™ Yeast DNA Purification Kitは、酵母などの真菌から高分子DNAを高効率、高純度で精製可能なキットです。プロトコールでは、65℃で非酵素的に溶解し、蛋白質を沈殿させて除去した後、核酸を沈殿および再懸濁します。Lyticaseやタンパク質分解酵素を使ったり、bead-beatingをおこなったりする必要はありません。MasterPure Kitを使用すると、市販されている他のキットよりも高い回収率で酵母ゲノムDNAを抽出できます（Fig.1）。プロトコールは、酵母のシングルコロニーなどの少量サンプルや、大量サンプルにも簡単に対応できます。回収された核酸は、PCR増幅などの多くのアプリケーションにそのまま使用できます。
利点
- 酵母染色体DNAを他のキットよりも高い回収率で回収できます
- 様々な酵母（Candida、Saccharomyces、Pichia、 Schizosaccharomycesなど）や糸状菌（Aspergillus、Penicillium）からDNAを回収できます
- 40分以内にDNAを精製可能です
- 酵素溶解はおこなわず、カラム、フェノールなどの有機溶媒を使用しません。Bead-beatingもおこないません
- 回収されたDNAは高分子DNA（Fig.2）でPCR増幅などの様々なアプリケーションに使用できます
Fig.1 MasterPure™ Yeast DNA Purification Kitと他社のキットとのDNA回収量の比較
DNAは、RNAをほとんど蛍光発光させないHoechst fluorescent dye 33258を用いて特異的に定量しました。 データはS.cerevisiaeとC.albicansの2実験で蛍光分析して得られたDNA回収量の平均値を表しています。MasterPure Kitは他社キットと比較してS.cerevisiaeでは17倍、C.albicansでは12倍多くのDNAを回収できました。
Fig.2 MasterPure™ Kitで回収されたDNAのサイズ分布
各キットを用いて、精製された酵母DNAの500ngを1%アガロースゲルでパルスフィールドゲル電気泳動により分析しました。ゲルはエチジウムブロマイドで染色しました。MasterPure Kitで回収されたDNAの大部分はサイズが40〜50kbの範囲でしたが、他社のキットでは短い断片に分解されているのがみとめられました
Lane M : λDNAマーカー、Lane 4 : T7 DNA(40kb)
| 製品名 | Cat.No. | 容量 |
| MasterPure™ Yeast DNA Purification Kit | MPY80200 | 200 Purifications |
| Contents: Yeast Cell Lysis Solution, MPC Protein Precipitation Reagent, TE Buffer, RNase A. | ||