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MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version ��
アプリケーション
ゲノムDNAを全血またはバフィーコートから精製し、様々な分子生物学的アプリケーションに
MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version IIは全血または場フィーコートからきわめて純度の高いゲノムDNAを抽出するキットです。プロトコールはDNA用に最適化されているため、600μLのバフィーコートから最大で100μgのDNAを30分以内に回収できます（Table. 1）。精製DNAには低分子量および高分子量のゲノムDNAが含まれており、PCR増幅反応のテンプレートとして（Fig.1）､または制限酵素処理（Fig.2）やサザンブロッティングなどの分子生物学的アプリケーションにそのまま使用できます。ゲノムDNAとTNAについては、全血およびバフィーコートから精製するためのプロトコールが添付されています。RNAサンプルについては、MasterPure RNA Purification Kit の使用を推奨します。いずれのプロトコールも、スケールアップによって大規模なサンプルに対応できます。
利点
- 325μLの全血から最大で10μgのDNA、600μLのバフィーコートから約100μgのDNAを安定的に回収可能です
- A260/A280 比は常に1.8〜2.0となります
- プロトコールは30分以内に完了します
- 回収率低下の原因となるカラムは使用しません
- 有機溶媒は使用しません
- 精製DNAはPCRにそのまま使用することも保存することもできます
- プロトコールはスケール変更が可能で、大規模または小規模のサンプルに対応できます
Table.1 MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version �兇砲茲�DNA回収率
| サンプル | 収量 | |
| 600 μl Buffy Coat | 87-109 μg | |
| 200 μl Whole Blood | 3-9 μg | |
| 0.6 ml Whole Blood | 9-27 μg | |
| 0.8 ml Whole Blood | 12-36 μg | |
| 1 ml Whole Blood | 15-45 μg | |
| 2 ml Whole Blood | 30-90 μg | |
| 3 ml Whole Blood | 45-120 μg | |
| 4 ml Whole Blood | 60-180 μg | |
| 5 ml Whole Blood | 75-225 μg | |
Fig.1 血液から精製されたDNAの効率的なマルチプレックスPCR
MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version IIを用いて精製したヒトゲノムDNAの100ngを、TAQXpedite PCR Systemとジストロフィン遺伝子の様々なエクソンに対応する9種類のプライマーセットを使用して増幅しました。血液DNA増幅反応を3回実施したところ、9種類全てのアンプリコンが確認されました。
Fig.2 MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version IIを用いて凍結全血から精製したヒトゲノムDNAの効率的な制限エンドヌクレアーゼ処理
精製DNAの1μgを各制限エンドヌクレアーゼで2時間処理しました
Lane M :kb marker Lane 1 : Bgl II、
Lane 2 : EcoR I、 Lane 3 : Hae III、
Lane 4 : Hind III、Lane 5 : Pvu II、
Lane 6 : Rsa I、 Lane 7 : Xba I
| 製品名 | Cat No. | 容量 | |
| MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version �� | MB711400 | For 400 ml of whole blood | |
| Contents: Red Cell Lysis Solution, Tissue and Cell Lysis Solution, MPC Protein Precipitation Reagent, RNase A, TE Buffer. | |||
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