MasterAmp™ Real-Time RT-PCR System

MasterAmp™リアルタイムRT-PCRキットは、高感度ワンステップ（one-step）またはツーステップ（two-step）反応で定量RT-PCRを行うために必要な試薬をすべて含みます。キットには、SYBR® Green I dye、バッファー、dNTPsおよびMgCl₂を含む、すぐに使用できる（Ready-To-Use）ミックス溶液になっています。さらにこのキットは、耐熱性DNAポリメラーゼで、逆転写活性も持つRetroAmp™ RT DNAポリメラーゼを使用しています。RetroAmp™ポリメラーゼ は、RNAテンプレートの2次構造を減少させる間にRT反応の特異性および感度を著しく増加させ、高いRT温度（70℃まで）で使用できます。

RT-PCRの感度、特異性を向上させる要因として、MasterAmp™リアルタイムのRT-PCRキットに含まれるMasterAmp™ PCR Enhancer（ベタイン）^*があります。これは。EnhancerはDNAおよびRNAの2次構造を減らし、核酸融解によるシーケンス構成依存を除去し、DNA合成間のポージングを減らします。

図1.MasterAmp™リアルタイムのRT-PCRキットを使用して、感度を増加させました。

β-アクチンRNAのリアルタイムPCRを、total cellular RNAを（赤）、500 pg（緑）、5 pg（青）を使用し、競合メーカーのキット（サプライヤーR）とMasterAmp™リアルタイムRT-PCRキットで比較検討しました。反応はBio-Rad社製iCycler iQ Real-Time PCR Detection Systemｓを用いました。

サプライヤーR

MasterAmp™ Real-Time RT-PCR System

図2. MasterAmp™ PCR Enhancerによるより高い一貫性β-アクチンの132-bp領域をヒト胎盤細胞RNA 100 ngからMasterAmpリアルタイムRT-PCRキットを使用して増幅しました。

MasterAmp PCR Enhancer量を増加させ使用しました。レーンM（100-bp ladder）; レーン1（追加Enhancerなし）; レーン2（0.5X Enhancer）; レーン3（2X Enhancer）。

ワンステップ（One-Step）とツーステップ（Two-Step）用のプロトコール

One-Tube One-Step One-Enzyme RT-PCR for Gene Specific Primers

遺伝子特異的プライマー用の1-チューブ、1-ステップ、1-酵素RT-PCR法

第1鎖cDNA合成およびPCR uninterruptedを1本のチューブ内で特異的プライマーを用いて行います。

One-Tube Two-Step RT-PCR for Non-Specific Primers

非特異的プライマー用の1-チューブ、2-ステップRT-PCR法

第1鎖cDNA合成をランダムoligo dTプライマーを用いて行います。つづくPCR反応で合成cDNAと特異的プライマーを使用します。

Application

• 正確なリアルタイムRT-PCR
• 低コピー数RNAの定量化

Benefits

• 非常に高感度および特異性のあるユニークな酵素ブレンドを使用。MasterAmp™ PCR Enhancerテクノロジーまたは図1および2を参照ください。
• 使いやすいPreMix solutionは、SYBR® Green I dyeを使用する定量PCRに必要なコンポーネントをすべて含んでいます。
• 高温RT-PCR（70℃まで）によるRNAの2次構造の減少
• 特異的なプローブの必要はありません。
• 柔軟なフォーマットでどんな種類のリアルタイムPCR機器にでも対応します。

*Covered by issued and pending patents.

SYBR is a registered trademark of Molecular Probes, Inc. SYBR® Green I Dye is covered by patents.

This product is accompanied by a limited license to use it in the Polymerase Chain Reaction (PCR) and RT-PCR for life science research in conjunction with a thermal cycler whose use in the automated performance of the PCR process is covered by the up-front license fee, either by payment to Applied Biosystems or as purchased, i.e., an authorized thermal cycler. See complete license statement.

内容：

• RetroAmp™ RT DNA Polymerase
• 2X Green RT-PCR PreMix
• MasterAmp™ 10X PCR Enhancer
• 25 mM MgCl₂
• 25 mM MnSO₄
• Sterile Water

製品のご購入・ご相談はTEL:03-3545-5720、またはお問い合わせまで。