MasterAmp™ PCR Optimization Kits
MasterAmp™ PCR Optimization Kitは簡単かつ迅速に、PCR法によるDNA増幅が可能です。また任意鋳型/プライマーの組み合わせで増幅する際、Kit中の12種類の反応試薬を用いることにより、至適条件を確定できます。12種類あるMasterAmp™ 2× PCR PreMixesには、l00 mM Tris-HCl, 100mM KCl, 400μM dATP,dCTP,dGTP,dTTP, 3,5 & 7mM MgCl2, MasterAmp™ PCR Enhancer™(with betaine)が加えられています。
- 初めて鋳型を増幅させる場合でも、Kit中の12種類の反応混合液を用いることにより、PCR至適条件を決定できます。(fig.1)
- 簡単なone-step法で、調製の必要はありません。
- MasterAmp™2X PCR PreMixesには鋳型、プライマー、耐熱酵素を除いたPCRに必要な全ての試薬が含まれています。
- PCRの増幅改善-GC含有量の高い鋳型も増幅可能です。
| 商品名 | Cat.No. | 包装単位 |
| MasterAmp™ PCR Optimization Kit | MOS001 | 20 templates |
| MO7201 | 60 templates |
20-temp, 60-tempに12種類のMasterAmp™ 2X PCR PreMixes(A-L) 0.5ml,1.5mlが付属しています。
耐熱性DNA合成酵素は含まれておりません。
MasterAmp™ 2X PCR PreMixes構成
400μM 各dNTPs, MgCl2 & MasterAmp™ PCR Enhancer(0-8X)
| 2X PCR PreMix | MgCl2 | MasterAmp™ Enhancer |
| A | 3.0 mM | 0X |
| B | 5.0 mM | 0X |
| C | 7.0 mM | 0X |
| D | 3.0 mM | 4X |
| E | 5.0 mM | 4X |
| F | 7.0 mM | 4X |
| G | 3.0 mM | 6X |
| H | 5.0 mM | 6X |
| I | 7.0 mM | 6X |
| J | 3.0 mM | 8X |
| K | 5.0 mM | 8X |
| L | 7.0 mM | 8X |
Individual MasterAmp PCR PreMixes
| 商品名 | Cat.No. | 包装単位 |
| MasterAmp™ 2X PCR PreMix A | MO7205A | 5 ml |
| B | MO7205B | 5 ml |
| C | MO7205C | 5 ml |
| D | MO7205D | 5 ml |
| E | MO7205E | 5 ml |
| F | MO7205F | 5 ml |
| G | MO7205G | 5 ml |
| H | MO7205H | 5 ml |
| I | MO7205I | 5 ml |
| J | MO7205J | 5 ml |
| K | MO7205K | 5 ml |
| L | MO7205L | 5 ml |
AmpliTherm™ or Taq DNA Polymerase PCR-Qualified(5U/μl) - 酵素のみ -
| 商品名 | Cat.No. | 包装単位 | 濃度 |
| AmpliTherm™ DNA Polymerase | AT72250N | 250 U | 5 U/μl |
| Taq DNA Polymerase | Q82250 | 250 U | 5 U/μl |
保存条件：-20℃
Figure 1. MasterAmp™ PCR Optimization Kitを用いて GC-rich templateのPCR増幅最適化について
A)
75% GCを含む human apo E遺伝子をTaq DNA Polymerase (Lane 1)を用いたスタンダードバッファー(PreMix B)、 or AmpliTherm™ DNA Polymeraseを用いた12種類のMasterAmp™ 2X PCR PreMixes (A-L) でPCR増幅(3 minutes at 94℃, then 30 cycles of 30 seconds at 95℃, 30 seconds at 60℃, and 30seconds at 72℃)しました。
B)
74% GC-richのB.pertussis IS481 をAmpliTherm™ DNA Polymeraseと PreMixes A-Lを用いてPCR増幅（10 minutes at 95℃, followed by 30 cycles of 1minute at 94℃, 1.5minutes at 60℃, and 2 minutes at 72℃）しました。
Figure 2. 選択されたMasterAmp™ PreMixを用いてのPCR増幅について
Panel A：human apo E gene をMasterAmp™ 2X PCR PreMix K
AmpliTherm™ DNA Polymerase を用いてFigure 1. と同一のcycling conditionsでPCR増幅しています。
Panel B：B. pertussis IS481 をMasterAmp™ 2X PCR PreMix K
AmpliTherm™ DNA Polymerase を用いてFigure 1. と同一のcycling conditionsでPCR増幅しています。
Lanes 1-10, amplification with MasterAmp™ PCR PreMixK.
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