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EZ-Tn5™ Transposase
Applications
- プラスミド、フォスミド、BAC等のベクターでクローニングしたDNAや直鎖状DNAにEZ-Tn5 transposonをIn vitro で挿入できます*
- EZ-Tn5 Transposomeが調製できます。EZ-Tn5 Transposomeは生細胞へのエレクトロポーレーションが可能であり、トランスポゾンをin vivo で挿入できます。**
EZ-Tn5™ TransposaseはTn5 transposaseの高活性体であり¹、あらゆる標的DNAにEZ-Tn5 Transposonをランダムにin vitro挿入できる（転位または「跳ばす」ことができる）高純度な単一サブユニット酵素です。標準的な反応1回でEZ-Tn5 Transposon挿入クローンが最大106種類得られます。Mg2+非存在下で本製品とEZ-Tn5 Transposonとをインキュベーションすることにより、安定なEZ-Tn5 Transpsome™複合体が得られます。EZ-Tn5 Transposomeは安定なため、生細胞にエレクトロポレーションすることができます。EZ-Tn5 Transposomeは細胞内へ導入後、細胞内のMg2+により活性化され、トランスポゾン配列が宿主のゲノムDNAにランダムに挿入されます。なお、Transposome複合体の3次元構造は、既に解明されています。
EZ-Tn5転位反応では、��EZ-Tn5 Transposase、��EZ-Tn5 Transposon、�Ｉ古�DNA、��Mg2+の4成分が必要です。標的DNAへのEZ-Tn5 Transposonのランダム挿入では、EZ-Tn5 Transposaseが触媒として作用する切り貼り機構で反応が進行し、挿入時にEZ-Tn5 Transposon両末端に隣接する9bpの標的DNA配列が重複します。
利点
- EZ-Tn5 Transposon上の高活性なMosaic End配列に加え、天然由来のトランスポゾンTn5・ミニトランスポゾンTn5上のOuter End配列を特異的に認識します。
References
- Goryshin, I.Y. and Reznikoff , W.S. (1998) J. Biol. Chem. 273, 7367.
- Davies, D.R. et al. (2000) Science 289, 77.
- Shevchenko, Y. et al. (2002) Nucleic Acids Res. 30, 2469.
*取得済み特許または出願中特許によって保護されています。
**トランスポゾンのin vivo挿入におけるTransposome™複合体（HyperMu™、EZ-Tn5™ Transposome™ 等）の使用は、米国特許6,159,736及びその関連特許、並びに申請中特許によるEpicentre社独自の技術です。
| 商品名 | Cat.No. | Size |
| EZ-Tn5™ Transposase | TNP92110 | 10 units |
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